Бактеріологічний посів - це аналіз, що виявляє в тому числі чутливість патогенного мікроорганізму до антибактеріальних лікарських засобів. За допомогою цього методу дослідження біологічного матеріалу фахівці визначають тип збудника інфекції, його концентрацію і патогенність, що допомагає лікарю призначити адекватне, ефективне для конкретного клінічного випадку специфічне лікування.
Що таке посів на чутливість до антибіотиків
Посів на чутливість, званий ще бакпосева на мікрофлору - це вид дослідження, застосовуваний при діагностиці венерологічних, гінекологічних, урологічних, дерматологічних та інших інфекційних захворювань. Після забору біологічного матеріалу проводиться його посів у різні поживні середовища. Через деякий час «розрослося» на ньому в результаті штучного культивування мікроорганізми тестують на чутливість до різних типів антибіотиків або протимікробних препаратів.
Дослідження, зване антибіотикограмою, демонструє, від препаратів який фармакологічної групи швидше за все загине збудник інфекції. Крім того, аналіз визначає концентрацію патогенних мікроорганізмів (виражається в КУО / мл, званих колонієутворюючих одиниць), їх резистентність (стійкість) по відношенню до медикаментозним засобам і зовнішнім факторам. Для проведення дослідження можуть забиратися наступні біоматеріали:
- кров;
- сеча;
- жовч;
- кал;
- сперма;
- спинномозкова рідина;
- слиз з уретри;
- слиз із цервікального каналу;
- слиз із зіву;
- слиз з носоглотки;
- мокрота;
- вміст кісти;
- вміст вогнища запалення;
- ранові відокремлюване;
- грудне молоко;
- секрет простати.
Вирощування колоній патогенних мікроорганізмів на досліджуваних матеріалах проводять в чашках Петрі, або спочатку в рідкому середовищі, а потім на скошеному агарі в термостаті протягом доби. Після штами отриманої культури переносять на предметне скло, фарбують і вивчають морфологічні властивості мікроорганізму під мікроскопом. Увагу звертають на розмір і форму клітин і їх тинкторіальних властивості (відношення до фарбування).
показання
Бакпосів на мікрофлору широко застосовується в медичній практиці при діагностиці інфекційно-запальних захворювань (в гінекології, урології, венерології, отоларингології, хірургії та інших областях), і при ризику розвитку сепсису (системної реакції на розвивається запалення). Аналіз на чутливість до антибіотиків дозволяє виявити і вивести збудників таких захворювань:
- бактеріальний вагініт;
- інфекційні ЗПСШ (захворювання, що передаються статевим шляхом);
- хламідіоз;
- гонорея;
- трихомоніаз;
- цистит;
- кишкова інфекція;
- пневмонія;
- туберкульоз;
- ангіна та багато інших. ін.
при вагітності
Визначення чутливості до антибіотиків при вагітності проводиться як мінімум двічі - відразу після постановки на облік і на 36 тижні. Робиться мазок з піхви і зі слизової оболонки зіва і носоглотки. Біоматеріал досліджують, визначають наявність урологічних і сечостатевих інфекцій і золотистого стафілокока - збудник, що провокує гнійний мастит, післяпологовий сепсис і ін. Інфекції в період після пологів. При наявності показань (захворювання нирок, підвищений рівень лейкоцитів в сечі та ін.) Можуть призначатися:
- посів сечі;
- мазок з шийки матки;
- зішкріб вагінального епітелію;
- бактеріальний посів з цервикального каналу.
Види досліджуваних мікроорганізмів
Залежно від типу біоматеріалу і показань до проведення аналізу за результатами дослідження виділяють наступні види патогенних збудників бактеріальних інфекцій:
- Слиз з носоглотки і зіва: золотистий стафілокок, гемолітичний стрептокок, менінгокок, листерия, коринебактерії дифтерії, гемофільна паличка, синьогнійної пневмококи.
- Гнійневідокремлюване, вміст ран, біопунктат: синьогнійна паличка, псевдомонад.
- Урогенитальная слиз: бактеріальна флора, збудники сечостатевих інфекцій (мікоплазма, гарднерела, уреаплазма, трихомонада, гриби, гонокок, листерия).
- Калові маси: тіфопаратіфозних бактеріальна група, кишкова група (иерсинии, сальмонели, шигели), анаеробні збудники харчових інфекцій, умовно-патогенні збудники кишкових інфекцій.
- Кров досліджують на стерильність.
- Решта біорідини - на забрудненість (бактеріальну флору).
Підготовка до аналізів
За статистикою, близько 80% помилок в лабораторних дослідженнях викликані помилками при зборі і транспортуванні матеріалів для обстеження. Як правило, паркан здійснює медичний персонал, але деякі біоматеріали хворий збирає сам. Тому при підготовці до здачі аналізу необхідно дотримуватися такі загальні правила:
- Під час забору біоматеріалу потрібно виключити потрапляння в нього антисептичних або дезінфікуючих з'єднань, обсіменіння бактеріями і іншими організмами. Для цього інструментарій та посуд для збору повинні бути стерильними.
- На результати посіву на антибіотики впливає прийом пацієнтом антибактеріальних та інших медикаментозних препаратів. Про терапії необхідно повідомити призначив аналіз лікаря, застосування ліків необхідно призупинити за термін не менше 10 діб до призначеної дати аналізу.
- Матеріали для обстеження повинні бути доставлені в лабораторію в спеціальних герметичних контейнерах в максимально короткі терміни. Під час транспортування зібрані біологічні рідини повинні бути захищені від впливу світла, температур, механічного впливу.
Як здавати аналіз
Бактеріологічний посів на чутливість до антибіотиків проводиться на різних видах біоматеріалу. Залежно від їх типу необхідно дотримуватися таких приписи фахівців при заборі проб:
- Збір сечі виробляють вранці, натщесерце, після попередньо проведених гігієнічних процедур. Необхідний обсяг урини становить від 10 до 15 мл. Забір проводять в спеціальну стерильну посуд, матеріал повинен бути доставлений в лабораторію не пізніше ніж через дві години.
- Мазок на чутливість до антибіотиків з носоглотки або зіву проводять вранці, до прийому їжі і води і до проведення гігієнічних процедур (чищення зубів і полоскання рота).
- Збір калу проводиться вранці, стерильною лопаткою в стерильний посуд, необхідний обсяг біоматеріалу - до 30 мг. Неприпустимо попадання сечі, використання клізми або проносних препаратів, заморожування. Термін доставки в лабораторію не повинен перевищувати 3-5 годин.
- Проба мокротиння доставляється в місце проведення дослідження протягом години після забору, який проводять натщесерце, після попереднього чищення зубів і полоскання рота.
- Пробу грудного молока беруть після проведення гігієнічних процедур і обробки шкіри навколо соска спиртом. Перед забором матеріалу в обсязі 5 мл (в стерильний посуд) зціджують від 15 мл рідини. Час доставки в лабораторію не повинно перевищувати 2 годин.
- Мазок з слизових піхви та інші види забору матеріалу на сечостатеві інфекції. Аналіз проводять не раніше ніж через 2 тижні після закінчення менструації (точну дату визначить лікар на основі даних про місячний циклі). Останнє сечовипускання повинно бути проведено за дві години до взяття проби у жінок і за 5-6 - у чоловіків.
- Обсяг забраної для посіву крові у дітей становить 5 мл, у дорослих - 15 мл.
Скільки робиться посів
Посів на флору і чутливість до антибіотиків проводиться протягом деякого тривалого часу (в порівнянні з готовністю результатів інших аналізів). Виділення штамів проводиться не однаково, тому що різні біологічні середовища людського організму вимагають індивідуальних підходів. Зразкові терміни результатів аналізів для різних типів біоматеріалу:
- Кал: від 5 днів до тижня.
- Урогенітальні матеріали: 4-10 днів.
- Кров: 10-14 днів (перші попередні дані готові через 3-4 дні).
- Слиз із зіву або носоглотки: від 5 до 7 днів.
- Посів на флору: 5-10 днів.
розшифровка
Бактеріологічний посів на чутливість до антибіотика дає уявлення про якісну і кількісної оцінки досліджуваного зразка. Якісна оцінка (наявність збудника) класифікується за такими чотирма ступенями зростання:
- Перша. При цьому ступені зростання на твердому середовищі відсутня, на рідкої реєструється невелике зростання.
- Друга. Невелике зростання на твердому середовищі (до 10 колоній).
- Третя. Значне зростання на твердому середовищі (10-100 колоній).
- Четверта. Більше 100 колоній.
При виявленні в результаті дослідження умовно-патогенної мікрофлори (непатогенних грамнегативнихбактерій) перші два ступені відносять до норми, при третього чи четвертого ступеня говорять про присутність в організмі мікробів-збудників інфекції, розмноження яких стало причиною виникнення і розвитку захворювання. При наявності в матеріалі патогенної мікрофлори все чотири ступені свідчать про наявність хвороби. Наприклад, сапрофітна мікрофлора в бакпосева сечі свідчить про інфекцію сечостатевої системи.
Кількісна оцінка проводиться в колонієутворюючих одиницях (КУО), що позначають об'єднання (співтовариство) клітин бактерій, що утворили колонію. Вона допомагає встановити ступінь обсіменіння і проконтролювати достатність призначених для лікування дозувань лікарських засобів (адекватність проведених медикаментозних призначень). Прийнято наступне умовне співвідношення КУО і мілілітрів:
- 1 колонія - це 103 КУО / мл.
- 1-5 колоній - це 104 КУО / мл.
- 5-15 колоній - це 105 КУО / мл.
- більше 15 колоній - це 106 КУО / мл
Тест на чутливість до антибіотиків, що проводиться одночасно з посівом на визначення збудника інфекції, називають антибіотикограмою. Виділивши патогенний мікроорганізм, його пересаджують в сприятливу для росту середу, де досліджується резистентність (чутливість) конкретного штаму до активних компонентів антибактеріальних препаратів. Чутливі до антибіотика патогенні клітини не ростуть в зоні його дії, стійкі показують зростання колоній.
Поширеним методом проведення антибіотикограми є метод дифузії змочених в антибактеріальній препараті паперових смужок в чашці Петрі з досліджуваної середовищем. Їх викладають по поверхні, відступаючи на два сантиметри від краю чашки і від один одного. Після 5-7 годин при кімнатній температурі чашу поміщають в термостат на термін від 3 до 5 днів. За результатами дослідження зростання колоній оцінюється наступним чином:
- Кільце навколо смужки діаметром від 2, 5 см говорить про підвищену чутливість мікрофлори до препарату;
- 2, 5-1, 5 см - стандартна чутливість (середня клінічна ефективність).
- до 1, 5 см - слабка реакція, лікування з високою ймовірністю не буде ефективним.
- Відсутність затримки росту колонії - повна стійкість до медикаментозного засобу.